曲霉菌在我们生存的环境中广泛存在,如土壤、腐败有机物、粮食和饲料等,有时也存在于人体的皮肤和粘膜表面。正常情况下不会对人体造成直接感染,但是对于免疫缺陷或者接受免疫抑制治疗的患者,曲霉菌感染却是常见的并发症之一,通过呼吸道吸入是常见的感染方式,目前曲霉菌已成为仅次于念珠菌的重要致病真菌。
一、什么是GM试验?
GM试验:检测的是半乳甘露聚糖(glactomannan,GM),半乳甘露聚糖是广泛存在于曲霉和青霉细胞壁的一种多糖,菌细胞壁表面菌丝生长时,半乳甘露聚糖从薄弱的菌丝顶端释放,是最早释放的抗原,可以通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法进行检测,主要适于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断。
在免疫抑制患者中侵袭性曲霉病(IA)的发病率由于抗生素的滥用而逐年增高,并成为其死亡的主要原因,其中烟曲霉菌是引起免疫抑制患者严重深部曲霉菌感染的最常见病原菌,其次还有黄曲霉菌、黑曲霉菌、土曲霉菌等。IA在血液病和造血干细胞移植患者中死亡率高达70%~90%,超成这种高死亡率的主要原因在于不能在病程早期对IA进行检测诊断,以至患者得不到及时有效的治疗而死亡,因此选择早期检测诊断方法具有重要的临床意义。
二、GM试验ELISA法检验原理
我们实验室使用的试剂盒是ELISA竞争法,使用特异性抗体检测曲霉菌半乳甘露聚糖抗原,先将预处理过的待检人血清样本与抗半乳甘露聚糖抗体混合并温浴后,加入包被有曲霉菌半乳甘露聚糖的酶标板中,经温育和洗涤后,加入酶标抗体,再经温育和洗涤加入TMB底物产生显色反应,用酶标仪在nm波长下测定其吸光度。吸光度值与半乳甘露聚糖含量呈负相关,因此实现对曲霉菌半乳甘露聚糖的定量检测。
三、标本要求
对曲霉菌半乳甘露聚糖抗原检测(GM试验)需使用红色普通管(加有促凝剂的红管)采集3-5ml的血液样本,离心分离出血清。样本在采集、转移和保存时须避免污染。念珠菌、隐球菌感染的样本对本产品检测结果无干扰。
四、结果判读
①如半乳甘露聚糖浓度≥0.85ug/L,则定为阳性。
②如半乳甘露聚糖浓度<0.65ug/L,则定为阴性。
③如半乳甘露聚糖浓度在0.65-0.85ug/L之间,应结合临床和影像学综合评价,建议连续检测观察。
建议:若怀疑高危人群,应动态监测,结合影像学、培养结果综合分析诊断。与G试验(1,3-β-D葡聚糖检测)联合可提高阳性率。
G试验、GM试验鉴定范围对比
种属
G试验
GM试验
念珠菌
+
-
镰刀菌属
+
-
隐球菌属
-
+
曲霉菌属
+
+
青霉
+
+
接合菌纲
-
-
五、对GM试验阴阳性的影响因素
1.假阳性影响因素:
①使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦;
②新生儿和儿童;
③血液透析;
④身免疫性肝炎等;
⑤食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物和污染的大米等。
2.假阴性影响因素:
①某些曲霉菌感染患者,半乳甘露聚糖会被分解或被抗体中和而造成假阴性;
②释放入血循环中的曲霉GM(包括甘露聚糖)并不持续存在而是会很快清除;
③以前使用了抗真菌药物;
④病情不严重;
⑤非粒细胞缺乏的患者。
安彩彩赞赏